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一、原理
在【zài】中性【xìng】条件下用【yòng】过硫酸钾使式样消【xiāo】解，将式样所含磷全部氧化为正磷酸【suān】盐，在酸【suān】性【xìng】介质【zhì】中，正磷酸盐与钼酸铵【ǎn】反映【yìng】，在锑盐存在下，生成【chéng】磷钼杂【zá】多酸，立【lì】即被抗坏血酸【suān】还原，生成蓝【lán】色络合物。
二、所需试剂
1、过硫酸钾，50g/L，5g过硫酸钾，纯水定容100ml。
2、抗坏【huài】血酸，100g/L，10g抗坏血【xuè】酸，纯水定容100ml。
3、硫酸，体积比1：1，150ml纯水【shuǐ】：150ml浓硫酸，体积300ml（硫【liú】酸配制【zhì】时注【zhù】意要将硫酸缓【huǎn】缓倒入水中【zhōng】，切勿将水倒入硫酸中【zhōng】，避免【miǎn】发生危险【xiǎn】，混合使用有水冷却）。
4、钼酸盐溶液【yè】，13g钼【mù】酸铵，纯【chún】水定【dìng】容100ml，0.35酒石酸锑钾纯水定容100ml，
不断搅【jiǎo】拌先将钼酸铵溶【róng】液【yè】缓缓【huǎn】倒入【rù】300ml（3试剂）硫酸【suān】溶液中，然后加【jiā】入配置好的酒石酸锑钾溶液缓【huǎn】和均匀【yún】。
5、浊度色度补【bǔ】偿液【yè】，纯水：浓硫酸：抗【kàng】坏血酸溶液（2试剂）=1:1:1，体积【jī】比。
（式样浑浊时，多做一个空白式样【yàng】（所取水样【yàng】，非空【kōng】白【bái】用纯水）加入此补偿液【yè】，加入【rù】过硫【liú】酸钾与其他式样一【yī】同消解，不加【jiā】抗坏血【xuè】酸及钼酸盐溶【róng】液【yè】显色）。
三、试样制备
1、取25ml所采水【shuǐ】样【yàng】，于50ml比色管中，共计两【liǎng】组【zǔ】，含一个平行【háng】样，取纯水25ml做【zuò】空【kōng】白样，取【qǔ】7.5ml磷标准使【shǐ】用溶液（2ug/ml），定容【róng】至25ml，做标【biāo】曲中间校核式样【yàng】，共计4组式样，若【ruò】有多家式样同时分【fèn】析，只增加平行【háng】样及式【shì】样，即每【měi】家增加两组式样，不增加空白式样和标曲中间校核【hé】式样【yàng】。
2、含浊度补偿液式样【yàng】的【de】准【zhǔn】备，针对浑浊的【de】水【shuǐ】样，即多增加【jiā】一个采集【jí】式样，加过硫酸钾消解，然【rán】后加【jiā】入色度补偿【cháng】液，不加抗坏血【xuè】酸和钼酸盐溶液进行显色。
四、式样消解
所有制备好的式【shì】样中（含空白【bái】式样及色度补【bǔ】偿式【shì】样），都【dōu】加入4ml过硫酸【suān】钾溶液【yè】（50g/L）,用布和线【xiàn】将比色【sè】管的【de】玻璃塞扎紧，至于高压蒸汽锅中【zhōng】加热，蒸汽锅压力【lì】为0.11mpa，温度120℃左右【yòu】，消解30分钟，然【rán】后取出【chū】，冷却至室温【wēn】，制得消解液。
五、显色
在消解液中加入【rù】1ml抗坏血酸（100g/L），混合均匀，30秒后【hòu】加入2ml钼酸铵溶液，混【hún】合【hé】均匀，静置【zhì】15分钟。（添加过【guò】浊度【dù】补偿【cháng】液的【de】式样不添加【jiā】抗坏【huài】血酸【suān】溶液和钼酸铵溶液，添加3ml浊度补偿液【yè】）。
六、分光光度测试
光程30mm比色【sè】皿，700nm波长，以【yǐ】纯【chún】水做【zuò】参比（既以纯水校【xiào】准分管光度计【jì】的透光率），分【fèn】别测定式【shì】样【yàng】中的【de】吸光【guāng】度，然后【hòu】扣除空白式样的吸光度。添加浊度补【bǔ】偿的式样，同样测试吸光度，用同批次显【xiǎn】色式样吸【xī】光【guāng】度扣除浊度【dù】补偿吸光【guāng】度，再扣除空白式样【yàng】吸光度。
七、标准曲线制作
取总磷标准溶液（1mg/mL）1ml，纯水定容至500ml，配【pèi】制成2ug/ml的标准使【shǐ】用液【yè】，取7支50ml具塞比色【sè】管，分别加入标准使用液【yè】，0ml，0.5ml，1ml，3ml，5ml，10ml，15ml，纯水定容至25ml，重复第四、第五【wǔ】，第【dì】六【liù】部【bù】分，测【cè】得吸光【guāng】度，然后用excel表【biǎo】格【gé】，绘制出【chū】标准曲线，相关【guān】系数【shù】在0.9990以上。
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